機械/剪切應力
?使用由ARGEN軟件控制的高架懸浮式磁力攪拌棒進行非接觸攪拌（3d打印結構，具有廉價且易于獲得的組件）
?通過往復式注射泵檢查不同管徑和成分的毛細管剪切
?由步進電機控制的頂置葉輪進行非接觸式攪拌（電機和驅動器價格低廉且易于獲得）
?通過蠕動泵從樣品杯中再循環蛋白質樣品
?通過蠕動泵通過不同過濾材料再循環蛋白質樣品
?通過注射器通過二級檢測器（MALS、熒光、UV等）從銀中連續提取蛋白質樣品，以提供補充分析方法
?用自動進樣器連續或離散提取蛋白質樣品進行GPC分析
非機械/剪切
?使用鹽、賦形劑、酸/堿、變性劑等實時直接滴定。
?生成德拜圖
?探測主持人：嘉賓互動
非常規實驗設備示例
機械/剪切應力
?三維打印機和/或基本加工設備（高架攪拌）
?麥克馬斯特卡爾是攪拌小零件的好來源，https://mcmaster.com
?注射泵（毛細管剪應力，通過二次檢測器提?。?/span>
?蠕動泵（再循環、過濾）
?高效液相色譜管和各種配件
非機械/剪切
?非常規應用程序（如滴定和德拜圖）更易于使用數據導出功能進行分析，生成用于外部分析的.csv文件
非接觸攪拌
?可連接到儀表控制（左）或通過步進電機獨立控制（右）
?攪拌器由連接到不銹鋼或聚四氟乙烯軸的磁力攪拌棒、壓入蓋（儀表控制）或直接插入鉆孔聚四氟乙烯蓋（步進電機控制）的微型軸承組成
?軸/攪拌器不得阻擋光路（距離單元底部約3-4 m
?頂部攪拌導致聚集明顯減少
?迄今為止檢測的蛋白質顯示，相對于接觸攪拌而言，重現性大大提高?通常觀察到滯后相
注：
?耦合磁攪拌，適用于聚集速度小于500 rpm的樣品，
步進電機控制需要更高的轉速
?利用往復式注射泵在銀監控下連續提取/注入樣本到試管中
?使用相同長度的管子（1米就足夠了）
?直接比較所需樣品的起始體積相等
?使用一致的流速
?管道材料和直徑會對觀察到的聚集率產生重大影響，如AR圖所示
管材的作用是
聚四氟乙烯>不銹鋼>聚醚醚酮
?當壓力源消除時，聚集停止
?再次施加壓力后，聚集將沿著類似的路徑繼續
?蠕動泵通常被認為施加最小剪切應力
?通過HPLC管通過試管再循環的樣品
?水和緩沖控制顯示光散射沒有增加
?不同蛋白質的穩定性差異很大
?用于通過HPLC管提取樣本的注射泵
?可直接通過檢測器提?。∕ALS、UV、熒光等）
?可連接到GPC的自動注射器（Rheodyne MXP7900）
?在施加壓力前開始抽取樣本
?將從ARGEN到二級探測器的死體積降至最低
?通過注射器泵通過自動注射器從反應杯中提取樣品
?定期將等分樣品注入GPC柱，并進行紫外線檢測
?在熱應力樣品（左）中觀察到顯著的單體損失和骨料形成，但在接觸攪拌應力樣品（右）中沒有觀察到
?馬爾斯銀
?角度依賴性隨骨料尺寸增加而增加
?能夠區分大量小骨料（熱應力）和少量大骨料
（攪拌應力）
?與攪拌應力相比，熱應力產生非常大的
角度相關性的微小變化
?MALS數據與GPC數據一致，表明熱應力期間形成小骨料
頂置與接觸攪拌
毛細剪應力
當應力消除時，攪拌和剪切應力聚集停止
蠕動再循環
蠕動循環w/過濾
耦合至二次探測器
熱應力與攪拌應力耦合GPC分析
基于耦合ARGENGPC-MALS的攪拌應力分析
辨別群體性質的能力
耦合ARGEN-GPC-MALS熱應力分析
