摘要

?評估IgG1單抗在不同緩沖液中的穩定性，包括檸檬酸鹽、磷酸鹽、MOPS和TRIS

   改變pH值以確定對抗體穩定性的影響

?比較每種緩沖液性能更好的pH值，以確定最佳緩沖條件

?盡管部分未折疊數據表明TRIS緩沖液更好，但三態模型的擬合顯示MOPS賦予抗體更好的整體穩定性

蛋白質表征的應用創新

 

介紹

重組DNA技術的進步促進了用于治療應用的單克隆抗體（mAb）數量的增加。

[1]，[2]mAb的高特異性使靶向治療具有較少的副作用，并開發出特異性的藥物傳遞分子。2

單抗生物制劑的開發包括通過以下方法優化單抗的穩定性：

 

圖1–IgG1單克隆抗體在0 M和6 M鹽酸胍下的熒光光譜。光譜中的紅移可以用來測量蛋白質的去折疊。

溶液條件的改變。配方過程包括在試驗其他賦形劑之前篩選不同的緩沖液和pH條件。2可以改變的溶液條件的數量可以增加進行所有配方試驗所需的mAb的時間和數量。

目前，熱方法，如差示掃描熒光法（DSF）和差示掃描量熱法（DSC）往往是首選，盡管缺點，如非平衡測量和熱改變溶劑條件。[3]化學變性具有可逆的優勢，平衡測量蛋白質的穩定性。

化學變性是用促潮劑（如鹽酸胍或尿素）展開蛋白質，[4]通過測量不同變性劑濃度下未折疊蛋白質的含量，可以確定蛋白質的穩定性。

利用化學變性，利用SUPR-CM熒光平板閱讀器，快速測定了一種新型單抗在不同緩沖溶液和不同pH值下的穩定性。平衡條件是通過讓制備的微孔板孵育24小時來實現的，如先前針對該單克隆抗體所確定的（數據未顯示）。